DNA de Solenidium lunatum (Lindl.) Kraenzl (Orchidaceae)

Elisa dos Santos Cardoso; Joameson dos Santos Lima; Cyntia Beatriz Magalhães Farias; Juliana de Freitas Encinas Dardengo; Ana Aparecida Bandini Rossi

doi:10.18378/rvads.v14i2.6072

Authors

Elisa dos Santos Cardoso Universidade do Estado de Mato Grosso http://orcid.org/0000-0001-9477-1743
Joameson dos Santos Lima Universidade do Estado de Mato Grosso http://orcid.org/0000-0001-8711-8252
Cyntia Beatriz Magalhães Farias Universidade do Estado de Mato Grosso http://orcid.org/0000-0001-6948-3344
Juliana de Freitas Encinas Dardengo Universidade do Estado de Mato Grosso http://orcid.org/0000-0002-2086-4514
Ana Aparecida Bandini Rossi Universidade do Estado de Mato Grosso http://orcid.org/0000-0002-8318-5375

DOI:

https://doi.org/10.18378/rvads.v14i2.6072

Keywords:

CTAB, Genetic diversity, Molecular markers, Orchid

Abstract

Molecular characterization and genetic diversity studies based on molecular markers require a quality DNA, free of contaminants such as phenols and polysaccharides, and also a sufficient quantity to perform polymerase chain reactions (PCR). Plant DNA extraction protocols are mostly based on the CTAB (Cetyltrimethylammonium Bromide) method, however due to the particularities of each plant, adjustments are required regarding the reagents used and the amount of them. The objective of this study was to evaluate different concentrations of CTAB and β-mercaptoethanol in the DNA extraction protocol of Solenidiumlunatum (Lindl.) Kraenzl (Orchidaceae), aiming future studies of genetic diversity using molecular markers. For the CTAB, 2% and 5% concentrations were tested, while for β-mercaptoethanol, 0% and 2% weretested. To verify if the extracted material was amenable to amplification, tests were performed with three primers ISSR (Inter Simple Sequence Repeats). The results indicated that all the methods were efficient in extracting DNA with quantity and quality required to perform PCRs. However, it is recommended to use the 2% CTAB protocol without addition of β-mercaptoethanol, since no significant differences in amplification results were found. The use of this protocol produces a quality material, capable of amplification, with reduction of costs and risk of intoxication.

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Author Biographies

Elisa dos Santos Cardoso, Universidade do Estado de Mato Grosso

Licenciada em Ciências Biológicas pela Universidade do Estado de Mato Grosso (1999), especialista em Biologia pela Universidade Federal de Lavras (2002), Licenciatura em Química pelo Instituto Federal de Mato Grosso (2013), Mestre em Biodiversidade e Agroecossistemas Amazônicos pela Universidade do Estado de Mato Grosso (UNEMAT), doutoranda da Rede de Biodiversidade e Biotecnologia da Amazônia Legal - BIONORTE . Atualmente é professora da Escola Estadual ´19 de Julho´, no município de Peixoto de Azevedo/MT-Brasil.

Joameson dos Santos Lima, Universidade do Estado de Mato Grosso

Graduado em Engenhearia Florestal pela Universidade do Estado de Mato Grosso. Mestrando do Programa de Mestrado em Genética e Melhoramento de Plantas pela Universidade do Estado de Mato Grosso, com o Projeto "Adaptabilidade e Estabilidade de Híbridos de Milho (Zea mays L.) em Diferentes Ambientes do Norte de Mato Grosso''. Tem experiência em genética molecular, biologia reprodutiva de espécies nativas, alelopatia e citotoxidade de espécies medicinais e tecnologia da madeira (propriedades físicas: umidade, densidade, contração e inchamento da madeira).

Cyntia Beatriz Magalhães Farias, Universidade do Estado de Mato Grosso

Nascida em Alta Floresta - MT,concluiu a graduação em Licenciatura Plena em Ciências Biológicas pela Universidade do Estado de Mato Grosso (UNEMAT/AF) no ano de 2008. Atualmente é estagiária voluntária no laboratório de Citogenética Vegetal e Cultura de Tecidos da UNEMAT/AF.

Juliana de Freitas Encinas Dardengo, Universidade do Estado de Mato Grosso

Possui graduação em Ciências Biológicas pela Universidade do Estado de Mato Grosso (2009), especialização em Didática do Ensino Superior pela Faculdade de Alta Floresta (FAF) (2012), mestrado em Biodiversidade e Agroecossistemas Amazônicos pela Universidade do Estado de Mato Grosso (UNEMAT) (2014) e doutorado em Biodiversidade e Biotecnologia pelo Programa de Pós-graduação da Rede Bionorte (PPG-Bionorte-MT) (2017). Atualmente é bolsista PNPD junto ao Programa de Pós-graduação em Biodiversidade e Agroecossistemas Amazônicos.

Ana Aparecida Bandini Rossi, Universidade do Estado de Mato Grosso

Graduada em Ciências Biológicas pela Universidade do Estado de Mato Grosso (1996), mestrado em Botânica pela Universidade Federal de Viçosa (2003) e doutorado em Genética e Melhoramento pela Universidade Federal de Viçosa (2007). Atualmente é professora adjunta da Universidade do Estado de Mato Grosso (UNEMAT). Tem experiência na área de Biologia Geral, com ênfase em Genética Vegetal, Biologia Molecular e Biologia da Conservação, atuando principalmente nos seguintes temas: Biologia Reprodutiva Vegetal, Filogeografia Molecular, Diversidade Genética Vegetal e conservação dos Recursos Naturais. Participa como orientadora dos Programas de Pós Graduação: Mestrado em Biodiversidade e Agroecossistemas Amazônicos, Genética e Melhoramento de Plantas e do Doutorado Biodiversidade e Biotecnologia da Amazônia Legal, da Rede Bionorte.

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