DNA de Solenidium lunatum (Lindl.) Kraenzl (Orchidaceae)

Elisa dos Santos Cardoso; Joameson dos Santos Lima; Cyntia Beatriz Magalhães Farias; Juliana de Freitas Encinas Dardengo; Ana Aparecida Bandini Rossi

doi:10.18378/rvads.v14i2.6072

Autores

Elisa dos Santos Cardoso Universidade do Estado de Mato Grosso http://orcid.org/0000-0001-9477-1743
Joameson dos Santos Lima Universidade do Estado de Mato Grosso http://orcid.org/0000-0001-8711-8252
Cyntia Beatriz Magalhães Farias Universidade do Estado de Mato Grosso http://orcid.org/0000-0001-6948-3344
Juliana de Freitas Encinas Dardengo Universidade do Estado de Mato Grosso http://orcid.org/0000-0002-2086-4514
Ana Aparecida Bandini Rossi Universidade do Estado de Mato Grosso http://orcid.org/0000-0002-8318-5375

DOI:

https://doi.org/10.18378/rvads.v14i2.6072

Palavras-chave:

CTAB, Diversidade genética, Marcadores moleculares, Orquídea

Resumo

Estudo de caracterização molecular e de diversidade genética com base em marcadores moleculares requer DNA de qualidade, livre de contaminantes como fenóis e polissacarídeos, e também em quantidade suficiente para realização de reações em cadeia da polimerase (PCR). Os protocolos de extração de DNA vegetal são, em sua maioria, baseados no método CTAB (Brometo de Cetiltrimetilamônio), contudo devido às particularidades de cada planta, são necessários ajustes quanto aos reagentes utilizados e à quantidade dos mesmos. Diante do exposto, este estudo teve por objetivo avaliar diferentes concentrações de CTAB e de β-mercaptoetanol no protocolo de extração de DNA de Solenidium lunatum (Lindl.) Kraenzl (Orchidaceae), visando futuros estudos de diversidade genética com utilização de marcadores moleculares. Para o CTAB foram testadas as concentrações 2% e 5%, enquanto que para o β-mercaptoetanol, foram testados 0% e 2%. Para verificar se o material extraído era passível de amplificação, realizam-se testes com três primers ISSR (Inter Simple Sequence Repeats). Os resultados indicam que todos os métodos foram eficientes na extração do DNA em quantidade e qualidade necessárias para realização de PCRs. Todavia, recomenda-se a utilização do protocolo CTAB 2% sem adição de β-mercaptoetanol, uma vez que não foram verificadas diferenças significativas nos resultados de amplificações. A utilização desse protocolo produz material de qualidade, passível de amplificação, com redução de custos e de riscos de intoxicação.

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Biografia do Autor

Elisa dos Santos Cardoso, Universidade do Estado de Mato Grosso

Licenciada em Ciências Biológicas pela Universidade do Estado de Mato Grosso (1999), especialista em Biologia pela Universidade Federal de Lavras (2002), Licenciatura em Química pelo Instituto Federal de Mato Grosso (2013), Mestre em Biodiversidade e Agroecossistemas Amazônicos pela Universidade do Estado de Mato Grosso (UNEMAT), doutoranda da Rede de Biodiversidade e Biotecnologia da Amazônia Legal - BIONORTE . Atualmente é professora da Escola Estadual ´19 de Julho´, no município de Peixoto de Azevedo/MT-Brasil.

Joameson dos Santos Lima, Universidade do Estado de Mato Grosso

Graduado em Engenhearia Florestal pela Universidade do Estado de Mato Grosso. Mestrando do Programa de Mestrado em Genética e Melhoramento de Plantas pela Universidade do Estado de Mato Grosso, com o Projeto "Adaptabilidade e Estabilidade de Híbridos de Milho (Zea mays L.) em Diferentes Ambientes do Norte de Mato Grosso''. Tem experiência em genética molecular, biologia reprodutiva de espécies nativas, alelopatia e citotoxidade de espécies medicinais e tecnologia da madeira (propriedades físicas: umidade, densidade, contração e inchamento da madeira).

Cyntia Beatriz Magalhães Farias, Universidade do Estado de Mato Grosso

Nascida em Alta Floresta - MT,concluiu a graduação em Licenciatura Plena em Ciências Biológicas pela Universidade do Estado de Mato Grosso (UNEMAT/AF) no ano de 2008. Atualmente é estagiária voluntária no laboratório de Citogenética Vegetal e Cultura de Tecidos da UNEMAT/AF.

Juliana de Freitas Encinas Dardengo, Universidade do Estado de Mato Grosso

Possui graduação em Ciências Biológicas pela Universidade do Estado de Mato Grosso (2009), especialização em Didática do Ensino Superior pela Faculdade de Alta Floresta (FAF) (2012), mestrado em Biodiversidade e Agroecossistemas Amazônicos pela Universidade do Estado de Mato Grosso (UNEMAT) (2014) e doutorado em Biodiversidade e Biotecnologia pelo Programa de Pós-graduação da Rede Bionorte (PPG-Bionorte-MT) (2017). Atualmente é bolsista PNPD junto ao Programa de Pós-graduação em Biodiversidade e Agroecossistemas Amazônicos.

Ana Aparecida Bandini Rossi, Universidade do Estado de Mato Grosso

Graduada em Ciências Biológicas pela Universidade do Estado de Mato Grosso (1996), mestrado em Botânica pela Universidade Federal de Viçosa (2003) e doutorado em Genética e Melhoramento pela Universidade Federal de Viçosa (2007). Atualmente é professora adjunta da Universidade do Estado de Mato Grosso (UNEMAT). Tem experiência na área de Biologia Geral, com ênfase em Genética Vegetal, Biologia Molecular e Biologia da Conservação, atuando principalmente nos seguintes temas: Biologia Reprodutiva Vegetal, Filogeografia Molecular, Diversidade Genética Vegetal e conservação dos Recursos Naturais. Participa como orientadora dos Programas de Pós Graduação: Mestrado em Biodiversidade e Agroecossistemas Amazônicos, Genética e Melhoramento de Plantas e do Doutorado Biodiversidade e Biotecnologia da Amazônia Legal, da Rede Bionorte.

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